Pemantauan dan Pengesahan Hasil Pembasmian Kuman dan Pensterilan Hidrogen Peroksida dalam Kabinet Biokeselamatan

Selepas menggunakan hidrogen peroksida (terutamanya VHP hidrogen peroksida yang diwap) untuk pembasmian kuman dan pensterilan dalam kabinet biokeselamatan, pemantauan yang ketat dan saintifik serta pengesahan keputusan adalah satu-satunya cara untuk mengesahkan keberkesanan pensterilan, serta keperluan teras untuk kawalan kualiti dan pematuhan peraturan. Ini bukan sekadar proses 'jalankan peranti', tetapi proses-gelung tertutup yang memerlukan berbilang bukti fizikal, kimia dan biologi.
Berikut adalah analisis sistematik teknik pemantauan dan pengesahan.
Prinsip teras: Sistem pengesahan tiga kali ganda
Pengesahan yang lengkap harus merangkumi "pemantauan parameter proses", "penunjuk kimia" dan "ujian cabaran penunjuk biologi", yang kesemuanya saling melengkapi dan amat diperlukan.

Ini ialah barisan pertahanan pertama untuk pengesahan, yang melibatkan-masa sebenar rakaman parameter fizikal dan kimia utama melalui penderia peranti, membuktikan bahawa kitaran pensterilan beroperasi dalam julat parameter yang ditetapkan dan berkesan.
Parameter pemantauan:
Kepekatan wap hidrogen peroksida (ppm): parameter yang paling kritikal. Ia mesti dicapai dan dikekalkan pada kepekatan sasaran yang telah ditetapkan (contohnya ratusan ppm) untuk tempoh masa yang mencukupi. Kepekatan yang rendah boleh menyebabkan kegagalan pensterilan.
Kelembapan relatif (% RH): dikawal pada tahap yang rendah (biasanya<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Suhu: Pantau suhu ruang, yang menjejaskan tekanan wap tepu dan proses pemeluwapan.
Tekanan/aliran udara: Pastikan ruang tertutup dan peredaran gas adalah normal.
Masa pendedahan: Tempoh dikekalkan pada kepekatan sasaran.
Bagaimana untuk melaksanakan:
Dilengkapkan secara automatik oleh penderia dan sistem kawalan yang terbina dalam penjana VHP.
Keperluan utama: Peralatan harus dapat menjana dan menyimpan graf data kitaran lengkap (lengkung masa kepekatan, lengkung suhu dan kelembapan), yang harus disertakan sebagai sebahagian daripada laporan pengesahan. Sebarang sisihan parameter daripada julat pratetap harus mengakibatkan penggera atau penamatan gelung.

Digunakan untuk menentukan dengan cepat dan intuitif sama ada sesuatu item terdedah kepada persekitaran pensterilan hidrogen peroksida, dan secara tidak langsung boleh mencerminkan sama ada dos itu mencukupi.
Jenis dan prinsip:
Kad penunjuk kimia jenis label: Mengandungi pewarna yang sensitif kepada hidrogen peroksida. Apabila jumlah dos hidrogen peroksida yang mencukupi (kepekatan x masa) terkumpul, perubahan tidak dapat dipulihkan daripada satu warna ke warna lain berlaku.
Lokasi penempatan: Ia harus diletakkan di lokasi pensterilan yang paling sukar dicapai, seperti:
Sudut paling dalam ruang kerja kabinet selamat.
Di dalam saluran saliran.
Sambungan antara penapis dan bingkai pemasangan (jika boleh).
Paip ekzos dalaman (jika ditutup dengan pembasmian kuman).
Fungsi dan batasan:
Fungsi: Menyediakan keputusan segera untuk pelepasan cepat; Sahkan bahawa wap telah diedarkan ke lokasi yang ditetapkan; Sebagai pengecam untuk membezakan antara item "diproses" dan "tidak diproses".
Had: Hanya boleh membuktikan pendedahan, tidak boleh membuktikan kemandulan. Perubahan warna hanya menunjukkan bahawa ambang dos minimum telah dicapai, tetapi tidak menjamin pembunuhan semua mikroorganisma.

Ini adalah piawaian emas pengesahan dan bukti yang menentukan. Dengan menggunakan spora mikrob piawai dengan rintangan tinggi yang diketahui, secara langsung terbukti bahawa proses pensterilan adalah mencukupi untuk membunuh mikroorganisma yang paling sukar untuk dibunuh.
Pemilihan penunjuk biologi:
Strain standard: Spora Geobacillus stearothermophilus. Ini adalah bakteria ujian standard yang diiktiraf di peringkat antarabangsa dengan rintangan paling kuat terhadap hidrogen peroksida.
Borang pembawa: biasanya jalur kertas berwarna titisan penggantungan spora, kepingan keluli tahan karat, atau dipasang pada pembawa tertentu.
Kiraan spora yang diketahui: Setiap penunjuk biologi mengandungi bilangan spora yang diketahui, biasanya 10 ^ 5 hingga 10 ^ 6 CFU (unit pembentuk koloni).
Strategi peletakan (langkah paling kritikal):
Lokasi: Ia mesti diletakkan di "titik paling sejuk" di mana pensterilan paling mencabar atau di mana gas paling sukar untuk menembusi. Untuk kabinet biokeselamatan, lokasi yang disyorkan termasuk:
Di bawah meja kerja, di sudut berhampiran gril hadapan.
Persimpangan antara dinding belakang dan meja kerja.
Di bahagian belakang atau di celah alat dalaman seperti pemegang pipet.
Jika skop pengesahan termasuk bahagian dalam injap ekzos atau saluran paip.
Kuantiti: Gunakan sekurang-kurangnya 3 penunjuk biologi dan sertakan satu kawalan positif yang tidak dirawat.
Proses ujian dan tafsiran:
Pendedahan: Lakukan kitaran pensterilan VHP lengkap dengan kabinet BI.
Kitar semula dan penanaman:
Selepas kitaran selesai, keluarkan BI dalam keadaan steril.
Masukkan ke dalam tiub pemulihan khusus yang mengandungi medium kultur.
Tanam dalam inkubator 56-60 darjah C selama 24-48 jam (masa tertentu mengikut arahan).
Pada masa yang sama memupuk kawalan positif (tidak disterilkan) dan kawalan negatif (medium kultur steril).
Tafsiran hasil:
Pengesahan berjaya: Semua media kultur BI yang disterilkan kekal jelas (tiada perubahan warna/kekeruhan), menunjukkan tiada spora hidup. Kawalan positif mesti menunjukkan pertumbuhan aktif (kekuningan/kekeruhan medium kultur), dan kawalan negatif mesti kekal jelas.
Kegagalan pengesahan: Mana-mana BI diproses yang menunjukkan pertumbuhan (kekuningan/kekeruhan) menunjukkan kegagalan kitaran pensterilan. Adalah perlu untuk menyiasat dengan teliti sebab-sebabnya (seperti ralat parameter, peletakan, kerosakan peralatan, isu pengedap, dll.), laraskan pelan dan lakukan pengesahan lengkap sekali lagi.

Pengesahan pertama:
Selepas pemasangan peralatan VHP atau pensterilan awal jenis kabinet keselamatan baharu, ia mesti dijalankan.
Ini adalah pengesahan paling komprehensif, yang memerlukan penentuan 'titik paling sejuk' dan mewujudkan parameter gelung yang berkesan.
Pengesahan semula biasa:
Biasanya dijalankan setiap enam bulan atau setiap tahun.
Digunakan untuk mengesahkan ketekalan peralatan, program dan pengendali.
Pemantauan harian:
Penunjuk kimia harus digunakan untuk setiap kitaran pensterilan, dan peta parameter proses harus dikaji semula.
Kekerapan ujian penunjuk biologi boleh dikurangkan mengikut kesesuaian (seperti bulanan atau suku tahunan), tetapi kawasan yang mempunyai peraturan yang ketat mungkin memerlukan penggunaan setiap kelompok/kitaran.

Semua aktiviti pemantauan dan pengesahan mesti didokumenkan secara rasmi, dan laporan itu hendaklah mengandungi sekurang-kurangnya:
Maklumat peralatan: model dan nombor penjana VHP.
Maklumat peranti sasaran: Model kabinet biokeselamatan, nombor, lokasi.
Parameter gelung: tetapkan kepekatan sasaran, masa, suhu dan kelembapan, dsb.
Graf data proses: keluk masa kepekatan operasi sebenar, dsb.
Penunjuk kimia: jenis, nombor kelompok, lokasi penempatan, keputusan perubahan warna (dengan gambar dilampirkan).
Penunjuk biologi: terikan, nombor kelompok, kuantiti spora, lokasi penempatan, hasil kultur (dilampirkan dengan foto tiub kultur).
Kesimpulan: Tentukan dengan jelas sama ada kitaran pensterilan berkesan.
Pelaksana dan Tarikh: Tandatangan pengendali dan penyemak.

ringkasan
Pensterilan tanpa steril adalah bersamaan dengan tiada pensterilan.
Sistem pengesahan yang boleh dipercayai untuk pembasmian kuman hidrogen peroksida dan pensterilan kabinet biokeselamatan ialah:
Pastikan kawalan proses melalui "pemetaan parameter proses", mencapai pelepasan visual yang cepat melalui "penunjuk kimia", dan akhirnya mendapatkan pensijilan keberkesanan muktamad mikrobiologi melalui "ujian cabaran penunjuk biologi".
Sistem pengesahan tiga kali ganda ini adalah kunci untuk meningkatkan pembasmian kuman hidrogen peroksida daripada "operasi" kepada "sains" yang boleh dikesan, boleh dihasilkan semula dan boleh dipercayai, dan juga merupakan asas untuk memenuhi keperluan akreditasi makmal GLP, GMP dan biokeselamatan di dalam dan luar negara. Pengurus makmal mesti melaksanakan ini sebagai prosedur wajib dan memantaunya secara berterusan.